高中_生物_生物选修_选修一_生物人教版选修1练习含解析_生物人教版选修1练习：5.3血红蛋白的提取和分离含解析

课时训练14　血红蛋白的提取和分离1.下列关于凝胶*谱柱的*作,正确的是(　　)。A.将橡皮塞上部用*切出锅底状的凹穴B.将橡皮塞下部用*切出凹穴C.*入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D.将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片解析:制作凝胶*谱柱时,先选择合适的橡皮塞打孔,然后将橡皮塞上部用*切出锅底状的凹穴,取适宜长度的玻璃管*入橡皮塞孔内,*入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。将尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片,覆盖在橡皮塞的凹穴上,再用尼龙纱将橡皮塞上部包好,*入到玻璃管的一端。*:A2.使用SDS—聚*烯酰*电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于(　　)。A.电荷的多少　　　　　　B.分子的大小C.肽链的多少D.分子形状的差异解析:SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物,SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。*:B3.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用**缓冲液处理的目的是(　　)。A.防止血红蛋白被氧气氧化B.血红蛋白是一种碱*物质,需**中和C.**缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和*质解析:**缓冲液的作用是稳定pH,从而维持血红蛋白的结构和*质。*:D4.蛋白质的提取和分离分为哪几步?(　　)A.样品处理、凝胶*谱*作、SDS—聚*烯酰*凝胶电泳B.样品处理、凝胶*谱*作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定解析:蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。A中凝胶*谱*作及SDS—聚*烯酰*凝胶电泳为实验*作过程中的技术。*:C5.下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验,叙述正确的是(　　)。A.前者选择鸡血细胞作为实验材料较好,后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好B.样品预处理时,前者静置1天处理除去上清液;后者需要加入清水,反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄*C.在DNA粗提取实验中,往2mol/L*化*溶液中加入蒸馏水析出DNA时,应该缓慢加入,直到出现黏稠物即止D.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等解析:鸡血细胞有细胞核,适于提取DNA;哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器,适用于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中,洗涤红细胞时,不能加清水,应该加入生理盐水,否则细胞会提早释放出血红蛋白与杂质混合,加大提取难度。DNA初次析出时,加蒸馏水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白,以利于血红蛋白的分离和纯化。*:A6.关于凝胶*谱柱的装填,除哪项外均为正确解释?(　　)A.交联葡聚糖凝胶(SephadexG75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值B.*谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装C.用300mL物质的量浓度为20mmol/L的**缓冲液充分洗涤平衡凝胶12hD.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液解析:本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(SephadexG75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5g;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重装;在洗脱过程中,应在约50cm高的*作压下,用300mL物质的量浓度为20mmol/L的**缓冲液充分洗涤平衡凝胶12h,以使凝胶装填紧密;凝胶溶胀时,应使用蒸馏水将其充分溶胀,制成凝胶悬浮液。*:D7.下列各项中,一般不影响在凝胶*谱法分离蛋白质中的分离度的是(　　)。A.层洗柱高B.层洗柱的直径C.缓冲溶液D.样品的分布解析:分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度。样品的分布也影响分离度。缓冲溶液的pH影响蛋白质所带的电荷,因此也影响分离度。只有层洗柱的直径一般不影响分离度。*:B8.已知某样品中存在*、乙、*、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、电荷的*质和电荷量情况如下图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是(　　)。A.若将样品以2000r·min1的速度离心10min,分子戊存在于沉淀中,则分子*也存在于沉淀中B.若用凝胶*谱柱分离样品中的蛋白质,则分子*移动速度最快C.将样品装入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋内,则分子*也保留在袋内D.若用聚*烯酰*凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子*和分子*形成的电泳带相距最远解析:若用离心法分离蛋白质,则相对分子质量大的分子先沉淀下来,即*在沉淀中。若用凝胶*谱柱分离样品中的蛋白质,则相对分子质量越小,移动越慢,即*的移动速度最慢。将样品装入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋内,则相对分子质量更大的*也保留在袋内。蛋白质在聚*烯酰*凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素,据图无法判断五种蛋白质在凝胶上的电泳带距离;为消除净电荷对迁移率的影响,可在凝胶中加入SDS使电泳的迁移率完全取决于分子的大小。*:C9.下列关于凝胶*谱法的原理及*作,不正确的是(　　)。A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,以致最后流出C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D.一般情况下,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来解析:凝胶*谱法是根据相对分子质量大小不同分离蛋白质的有效方法。凝胶是由多糖类化合物构成的,其内部有很微细的多孔网状结构,小分子蛋白质可以进入凝胶内部,路程较长,移动速度慢,而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部,路程较短,移动速度快,因此在洗脱过程中分离。选用不同种凝胶,其网状结构不同,孔隙大小不同,可分离的分子大小不同,二者是相关的,故C项不正确。*:C10.在装填*谱柱时,不得有气泡存在的原因是(　　)。A.气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果B.气泡阻碍蛋白质的运动C.气泡能与蛋白质发生化学反应D.气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密解析:装填凝胶柱时,产生的气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,从而影响分离效果。*:A11.下面说法不正确的是(　　)。A.在一定范围内,缓冲溶液能够*外界的*和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变B.缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成C.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D.透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内解析:透析袋一般是用**纤维素(又叫玻璃纸)制成的。透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液。*:D12.下列关于样品的加入和洗脱的*作,不正确的是(　　)。A.加样前,打开*谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B.用吸管小心地将1mL透析后的样品加到*谱柱的顶端,不要破坏凝胶面C.加样后,打开下端出口,使样品渗入凝胶床内D.等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口解析:选项A中,应该是使缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐,而不是下降到凝胶面的下面。其他选项符合凝胶*谱法的基本*作。*:A13.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2和部分CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。(1)将实验流程补充完整:A为　　　　　　,B为　　　　　　。凝胶*谱法的基本原理是根据　　　　　　　　　　　　　　而分离蛋白质。 (2)洗涤红细胞的目的是去除　　　,洗涤次数过少,无法除去　　　;离心速度过高和时间过长会使　　　一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是　　　　　　　　　　　。释放血红蛋白的过程中起作用的是　。 (3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的**缓冲液(pH为7.0)的目的是 　　　　　　　　。如果红*区带　　　　　　　,说明*谱柱制作成功。 解析:本题考查血红蛋白提取和分离的实验步骤和基本*作。*:(1)血红蛋白的释放　样品的加入和洗脱　蛋白质相对分子质量的大小(2)杂蛋白(血浆蛋白)　血浆蛋白　白细胞和淋巴细胞　离心后的上清液中没有黄*　蒸馏水和*苯(3)准确模拟生物体内的生理环境,保持体外的pH和体内的一致　均匀一致地移动14.下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题。(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有　　　功能。 (2)*装置中,B是血红蛋白溶液,则A是　　　　　;乙装置中,C溶液的作用是　　　　　　　。 (3)*装置用于　　　　,目的是　　　　　　　　。用乙装置分离蛋白质的方法叫　　　　,是根据　　　　　　　　　分离蛋白质的有效方法。 (4)用乙装置分离血红蛋白时,待　　　　　　　　　时,用试管收集流出液,每5mL收集一管,连续收集。 解析:A表示**缓冲液,B表示血红蛋白溶液,C表示缓冲液。*装置可对血红蛋白粗分离,血红蛋白留在透析袋中,而小分子物质进入缓冲液。乙装置中的缓冲液(C)可对*谱柱中的血红蛋白进行洗脱。*:(1)运输(2)**缓冲液　洗脱血红蛋白(3)透析(粗分离)　去除样品中相对分子质量较小的杂质　凝胶*谱法　相对分子质量的大小(4)红*的蛋白质接近*谱柱底端15.下面是某研究小组开展的“猪血浆某白蛋白的提取及相对分子质量测定”研究,请协助完成有关问题。材料仪器:新鲜猪血、低速冷冻离心机、透析袋、电泳仪等。化学试剂:pH为7.4的缓冲液、柠檬**、奈氏试剂(与NH4+反应出现黄*或红棕*沉淀)、饱和(NH4)2SO4溶液、生理盐水等。实验步骤:(1)样品获取:向新鲜猪血中加入　　　　　　,静置一段时间后取上层血浆。 (2)盐析法粗提蛋白质。①向血浆中加入一定体积的饱和(NH4)2SO4溶液,使(NH4)2SO4的浓度达到50%,充分混合后静置、离心,取沉淀物。②向沉淀物中加入适量生理盐水使之溶解,再向其中加入一定体积的饱和(NH4)2SO4溶液,使(NH4)2SO4的浓度达到33%,充分混合后静置、离心,取沉淀物。③重复步骤①②2~3次,最后用生理盐水将沉淀溶解即得粗提品。盐析粗提取“血浆某白蛋白”的主要原理是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,重复步骤①②的主要目的是　　　　　　　　　。 (3)透析除盐:将粗提品装入透析袋,以pH为7.4的缓冲液做透析液,每隔4h更换一次透析液,每次更换前利用奈氏试剂检测透析液中NH4+的量。利用缓冲液做透析液的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。检测中,若观察到透析液　　　　　　　　　　　　　　　　时,即可终止透析。 (4)凝胶*谱法分离:透析后的样品经凝胶柱洗脱,获得纯净血浆某白蛋白样品。(5)相对分子质量测定:化学物质SDS能使蛋白质变*,解聚成单条肽链。在聚*烯酰*凝胶电泳中加入一定量的SDS,使电泳迁移率完全取决于肽链的分子大小。上图为本实验中用SDS—聚*烯酰*凝胶电泳鉴定血浆某白蛋白的结果。根据电泳结果,某同学得出“提取的血浆某白蛋白有两条肽链”的结论,这种说法可靠吗?理由是  　　　　　　　　　　　　　。 解析:(1)为防止血液凝固,在采血容器中要预先加入抗凝血剂柠檬**。(2)利用血浆某白蛋白在一定浓度(NH4)2SO4溶液中的溶解度低的特*去除杂蛋白。(3)过*、过碱、温度过高都会使蛋白质变*。(5)电泳的原理是利用待分离样品中各种分子带电*质的差异以及分子的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度。本实验只能判断肽链的大小,而不能判断其条数。*:(1)(适量的)柠檬**(2)该血浆白蛋白在50%和33%的(NH4)2SO4溶液中溶解度低　除去更多的杂蛋白(3)防止pH变化对蛋白质结构的影响　不出现黄*或红棕*沉淀(5)不可靠,只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链,不一定是两条